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?? 概述
PCR產物為雙鏈DNA分子,其穩定性受溫度影響極大。高溫會加速水解反應和酶促降解,導致DNA斷裂;低溫則能有效抑制這些過程。因此,選擇合適的保存溫度是確保后續克隆、測序或電泳實驗成功的關鍵。
??? 不同溫度下的穩定性表現
以下表格總結了PCR產物在不同溫度條件下的穩定性和推薦保存時長:
(補充說明)有研究表明,DNA比RNA更耐熱,短時間室溫放置不會立即完全降解,但仍可能出現彌散條帶或產量下降的現象 。
此外:若將PCR產物溶于Tris緩沖液而非純水,可在-20℃下延長保存時間至1–2個月,因緩沖液能提供更穩定的pH環境 ()]。
采用真空干燥后凍存的方法,可使PCR產物在-20℃下保存長達一兩年。
? 建議
為保證PCR產物的最佳穩定性:
長期保存:優先選擇-20℃或-80℃,并分裝避免反復凍融;
短期使用:4℃存放不超過3天;
立即使用:可在室溫短暫放置,但應控制在48小時內 。
