虹彩病毒科(Iridoviridae)下分 5 個屬, 即蛙病毒屬(Ranavirus)、淋巴囊腫
病毒屬(Lymphocystivirus)、細胞腫大病毒屬(Megeaocytoviurs)、虹彩病毒屬
(Iridovirus)和綠虹彩病毒屬(Chloriridovirus)。其中后 2 個病毒屬感染昆蟲, 而
前 3 個病毒屬的虹彩病毒感染多種水生經(jīng)濟動物并呈全球性分布。
蛙病毒屬是虹彩病毒科中成員最多的一屬，為裸露或有囊膜的二十面體病毒
粒子，基因組為單分子、線狀雙鏈 DNA，病毒直徑約 150-170 nm，DNA 全
長為 150-170 kb。其中大部分病毒都會引起水生動物疾病, 包括流行性造血器
官壞死病毒(epizootic haematopoietic necrosis virus, EHNV)、斑點叉尾鮰
虹彩病毒(catfishiridovirus)、黑真鮰蛙病毒(ictalurus melas ranavirus)和虹
鱒蛙病毒 (oncorhynchus mykiss virus) 、 歐 鯰 病 毒 (european sheetfishiridovirus,
ESV)、歐洲鮰魚病毒(european catfish virus，ECV)、飾紋
汀蛙虹彩病毒(bohle iridovirus，BIV)、虎紋蛙病毒(tiger frog virus，TFV)等
數(shù)十種病毒。蛙病毒屬病毒感染宿主范圍廣泛，涉及魚類、兩棲類、爬行類近百
種水生動物, 而且發(fā)病率和死亡率都很高。
鑒于蛙虹彩病毒對水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的嚴重危害, 有必要建立一種準確、快速、靈
敏的檢測方法對其進行監(jiān)控, 保證水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展。本產(chǎn)品即是基于 PCR
方法對飾紋汀蛙虹彩病毒 BIV 的快速檢測試劑盒。它具有下列特點：
1. 即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單。
2. 預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 625 bp。
3. 本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

運輸及保存:

使用方法:

一、樣品 DNA 的制備
用自選方法純化待測樣品的 DNA。
二、陽性對照
1. 為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體菌做陽性對
照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 使用本陽性對照時，由于其濃度較高，一定要注意不要污染其他試劑和成分。
最好在專門的區(qū)域操作。
三、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（25 uL 體系）
3. 在 PCR 管中加入下列成分：
成 份 樣品 陽性對照 陰性對照
BIV 專一性引物對 2 uL 2 uL 2 uL
樣品 DNA 1-5 uL 無 無
BIV 陽性對照 無 2 uL 無
補超純水到 12.5 uL 12.5 uL 12.5 uL
即用型 PCR Mix 3.0 12.5 uL 12.5 uL 12.5 uL
4. 輕柔混勻后上機，按下面參數(shù)進行 PCR。
過程 溫度 時間
預(yù)變性 94℃ 5 min
PCR 反應(yīng)
（30 個循環(huán)）
94℃ 15 s
57℃ 30 s
72℃ 1 min
延伸 72℃ 2 min
5. 電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 625 bp